第1章　 发酵工程 重点突破练(一)（练习（答案） 课件2份打包）

(共48张PPT)
重点突破练(一)
第1章 发酵工程
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题组一　传统发酵技术
1.下列关于传统发酵的叙述，正确的是
A.每日从泡菜坛中取少量泡菜品尝，以确定自制泡菜是否可以食用
B.利用传统作坊中的酒曲，有利于大规模生产黄酒
C.将葡萄汁煮沸冷却后灌入约2/3瓶，密闭发酵即可自制葡萄酒
D.腐乳制作过程中需要添加蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等
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泡菜制作过程中乳酸菌进行无氧呼吸，不能每天打开泡菜坛，否则会导致发酵失败，A错误；
酒曲中含有酵母菌，利用传统作坊中的酒曲，有利于大规模生产黄酒，B正确；
发酵果酒的葡萄汁不能煮沸，否则会杀死葡萄汁中的野生酵母菌，C错误；
在腐乳制作发酵过程中，微生物会产生蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等多种酶，不需要添加，D错误。
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2.(2024·清远高二期中)泡菜是我国的传统美食，早在《诗经》中就有“中田有庐，疆场有瓜，是剥是菹，献之皇祖”的诗句，其中“庐”和“瓜”是蔬菜，“剥”和“菹”是腌制加工的意思。下列关于泡菜制作的叙述，正确的是
A.制备泡菜时，盐水煮沸后可以立即使用
B.腌制时间长短和温度高低不会影响亚硝酸盐的含量
C.泡菜“咸而不酸”可能是盐水浓度过高，抑制乳酸菌发酵所致
D.泡菜腌制过程中乳酸和亚硝酸盐的含量均先增加后趋于稳定
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制备泡菜时，盐水煮沸冷却后再使用，防止高温杀死乳酸菌，A错误；
影响亚硝酸盐含量的因素较多，如制作泡菜时食盐用量、腌制时间长短和温度高低等，B错误；
泡菜腌制过程中，亚硝酸盐含量先增加后减小，最后趋于稳定，乳酸含量先增加后保持稳定，D错误。
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3.(2023·邯郸高二期末)蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”“口服化妆品”等。如图是以新鲜蓝莓为原料制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图。下列叙述错误的是
A.在制作蓝莓酒时，温度应该控制在18～30 ℃
B.若氧气、糖源充足，蓝莓汁可直接经过程③发酵为蓝莓醋
C.若处理不当，在酒精发酵旺盛时，醋酸菌可将糖分解为乙酸
D.在酸性条件下用重铬酸钾溶液检测，若果汁出现灰绿色说明有蓝莓酒产生
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参与果酒制作的微生物是酵母菌，其最适生长温度约为28 ℃，在制作蓝莓酒时，温度应该控制在18～30 ℃，A正确；
过程③是乙酸发酵，所用的微生物是醋酸菌，醋酸菌在氧气、糖源都充足的条件下可直接将蓝莓汁发酵为蓝莓醋，B正确；
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酒精发酵为无氧环境，而醋酸菌是好氧细菌，即使发酵装置中含有醋酸菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸菌也不能将果汁中的糖分解为乙酸，C错误；
利用重铬酸钾溶液在酸性条件下检测，若出现灰绿色，说明有酒精产生，D正确。
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4.如图1为果酒、果醋制作装置，图2为果酒发酵中酵母菌种群数量、葡萄糖浓度和乙醇浓度的变化曲线。下列叙述正确的是
A.制作果酒的整个过程中，夹子①②均关闭，制作果醋时，夹子①②均打开
B.制作果酒时应将图1装置放在18～
30 ℃环境中，制作果醋时应将温
度提高至30～35 ℃
C.图2曲线a～b段，瓶内有大量二氧
化碳和水产生，导致瓶内气压增大
D.随着发酵时间的推进，葡萄糖含量
降低，乙醇的产生速率先上升后趋于稳定
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制作果酒的过程中，夹子①先打开后关闭，夹子②在发酵过程中间歇打开，果醋发酵时需要氧气，
因此用图1装置进行果醋发酵时，
需打开夹子①②，A错误；
图2曲线a～b段，酵母菌进行有
氧呼吸，大量繁殖，酵母菌有
氧呼吸过程中氧气消耗量等于
二氧化碳产生量，因此瓶内的气压基本不变，C错误；
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分析图2可知，随着发酵时间的推进，葡萄糖含量降低，乙醇的浓度先上升后趋于稳定，但乙醇的产生速率先上升，后下降为0，D错误。
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题组二　微生物的基本培养技术
5.(2024·阳泉高二期中)无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开。下列说法正确的是
A.巴氏消毒的最大优点是能够杀死牛奶中的全部微生物
B.对接种室、涂布器、操作者的衣着和双手需要进行消毒处理
C.培养基可借助高压蒸汽灭菌锅或干热灭菌箱进行灭菌
D.利用寄生于细菌体内的微生物裂解细菌来净化污水属于生物消毒法
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巴氏消毒的最大优点是能够杀死牛奶中的绝大部分微生物，并且基本不破坏牛奶的营养成分，A错误；
对接种室、操作者的衣着和双手需要进行消毒处理，对涂布器要进行灭菌处理，B错误；
培养基可借助高压蒸汽灭菌锅进行灭菌，不能用干热灭菌箱进行灭菌，C错误。
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①区域是划线开始的区域，此区域接种微生物较多，不易出现单菌落，④区域最易出现单菌落，是观察菌落特征的最佳区域，C错误。
6.(2023·昭通高二期中)如图是利用平板划线法在培养基上获得微生物单菌落的实验操作，下列叙述错误的是
A.划线操作时，接种环只蘸取一次菌液
B.不能将第④区域的划线和第①区域的相连
C.观察菌落特征的最佳区域是①区域
D.在②～④区域划线前后均要灼烧接种环
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7.如图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法正确的是
A.制备培养基的过程是先灭菌再调pH
B.操作步骤②③④时接种环只需要在接种前和划线结束后灼烧灭菌
C.完成上述纯化过程，接种环共需灼烧处理6次
D.接种结束后，将平板倒置培养，在皿盖上标注菌种及接种日期等信息
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步骤①表示倒平板，倒平板的培养基需要先调节pH后灭菌，A错误；
接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以完成步骤④中5次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，防止造成污染，由此可见，完成步骤④共需灼烧接种环6次，B错误，C正确；
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接种结束后，将平板倒置培养，在皿底上(不是在皿盖上)标注菌种及接种日期等信息，D错误。
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成分 牛肉膏 葡萄糖 K2HPO4 伊红—亚甲蓝 琼脂 蒸馏水
含量 10 g 10 g 2 g 0.46 g 适量 1 000 mL
8.如表为某培养基的配方，下列有关叙述正确的是
注：伊红—亚甲蓝可用于鉴别大肠杆菌，使菌落染成深紫色，带金属光泽。
A.能在此培养基上生长的只有大肠杆菌
B.培养基中葡萄糖作为碳源，牛肉膏可以作为碳源和氮源
C.该培养基调节合适的pH后就可以接种使用
D.从物理性质看，该培养基属于固体培养基，从用途看，该培养基属于选择培
养基
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此培养基中能生长多种微生物，不是只有大肠杆菌，A错误；
培养基中葡萄糖作为碳源并提供能量，牛肉膏可以为微生物的生长繁殖提供碳源和氮源，B正确；
该培养基调节合适的pH后要进行湿热灭菌操作，C错误；
从物理性质看，该培养基含有琼脂，属于固体培养基，从用途看，该培养基用于鉴定大肠杆菌，属于鉴别培养基，D错误。
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题组三　微生物的选择培养和计数
9.某种细菌菌株需要亮氨酸才能生长，但此菌株对链霉素敏感。实验者用诱变剂处理此菌株，想筛选出表格中细菌菌株类型，则配制相应选择培养基类型正确的是
选项 筛选出不需要 亮氨酸的菌株 筛选出抗链 霉素的菌株 筛选出不需要亮氨酸
且抗链霉素的菌株
A L＋　S＋ L－　S－ L＋　S－
B L－　S－ L＋　S＋ L－　S＋
C L－　S＋ L＋　S＋ L－　S－
D L＋　S－ L－　S－ L＋　S＋
注：L代表亮氨酸，S代表链霉素；“＋”代表加入，“－”代表不加入。
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筛选不需要亮氨酸的菌株时培养基中不需要添加链霉素和亮氨酸；筛选抗链霉素的菌株时需要向培养基中添加链霉素和亮氨酸；筛选不需要亮氨酸且抗链霉素的菌株时需要向培养基中添加链霉素，但不添加亮氨酸，B正确。
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10.某种物质X(一种含有C、H、O、N的有机物)难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解X。研究人员按照如图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解X的细菌菌株。
实验过程中需要甲、乙两种培
养基，甲的组分为无机盐、水
和X，乙的组分为无机盐、水、
X和Y。下列相关叙述中错误的是
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A.甲、乙培养基均属于选择培养基，乙培养基组分中的Y物质是琼脂
B.若要筛选高效降解X的细菌菌株，甲、乙培养基中X是唯一的碳源
C.步骤⑤的筛选过程中，各培
养瓶中的X溶液要有一定的
浓度梯度
D.步骤⑤的筛选过程中，若培
养基中的X浓度过高，某菌
株对X的降解量可能下降
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步骤⑤中自变量是挑取的不同的菌落，各培养瓶中的X溶液的浓度应该是一致的，C错误。
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稀释倍数 103 104 105 106 107
菌落数/个 1号平板 478 367 270 26 5
2号平板 496 354 268 20 8
3号平板 509 332 272 29 3
11.(2024·宝鸡高二月考)尿素是一种重要的农业肥料，尿素分解菌可合成脲酶，利用以尿素为唯一氮源的选择培养基可从土壤中分离尿素分解菌并进行计数，科研人员取0.1 g土壤分别稀释103～107倍，将0.1 mL不同稀释倍数的土壤稀释液接种在固体培养基上，在相同的培养条件下得到如表数据。下列叙述正确的是
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稀释倍数 103 104 105 106 107
菌落数/个 1号平板 478 367 270 26 5
2号平板 496 354 268 20 8
3号平板 509 332 272 29 3
A.利用稀释涂布平板法可将稀释液中的菌体完全分离，一个菌落对应一
个菌体
B.每克土壤中尿素分解菌的数量是2.7×108个
C.以尿素为唯一氮源的培养基上长出的菌均为尿素分解菌
D.若在显微镜下利用细菌计数板直接计数，则统计结果一般比实际活菌
数少
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利用稀释涂布平板法进行微生物的纯化和计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，A错误；
该实验中稀释倍数为105的平板菌落数在30～300范围内，最适合用来统计活菌数，每克土壤中尿素分解菌的数量为(270＋268＋272)÷3÷
0.1×105＝2.7×108(个)，B正确；
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以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不一定是尿素分解菌，有些微生物可以利用尿素分解菌的代谢物进行生长繁殖，C错误；
若在显微镜下利用细菌计数板直接计数，由于不能区分活菌和死菌，则统计结果一般比实际活菌数多，D错误。
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12.下列有关利用稀释涂布平板法对土壤中微生物进行计数的说法，正确的是
A.相同稀释倍数的样液至少涂布三个平板才能保证结果的准确性
B.将不同稀释度下计数的菌落数求平均值得到较为准确的菌落数
C.本实验无须设置空白对照组
D.土壤中真菌的数量比细菌的数量多，所以真菌的稀释倍数要比细菌大
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为了保证结果准确，一般选取同一稀释度下、菌落数在30～300的平板进行计数，B错误；
土壤中真菌的数量比细菌的数量少，D错误。
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13.(2024·雅安高二期中)如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图，下列有关叙述错误的是
A.获得高效分解尿素细菌纯培养物的关键是防止杂菌污染，故应对培养基及用具等
进行灭菌
B.步骤③采用稀释涂布平板法接
种，并需向牛肉膏蛋白胨培养
基中加入尿素
C.若要判断选择培养基是否起到
了选择作用，需要设置接种了的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照
D.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，分解尿素能力高的会产生更多的NH3，溶
液pH更高
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步骤③筛选分解尿素的细
菌，培养基中应以尿素为
唯一氮源，不能加入牛肉
膏蛋白胨，B错误。
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14.桑葚玫瑰酒既融合了桑葚和玫瑰的果香、花香，又使其营养价值和功能活性增加，能极大地满足人们的需求。图1为制作桑葚玫瑰酒的装置图；
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图2为不同桑葚汁与玫瑰质量比对花色苷含量、酒精度和感官评分(感官评分越高，品质越好)的影响。回答下列问题：
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(1)桑葚玫瑰酒发酵利用的菌种的代谢类型是
________________。在桑葚玫瑰酒发酵过程中，
图1装置的排气口要通过一个长而弯曲的胶管
与瓶身连接，目的是______________________。
制作桑葚玫瑰酒时，原料只装容器的2/3，预
留一定空间的目的是______________________
____________________________________________________________________________________________。
异养兼性厌氧型
防止空气中微生物的污染
防止发酵过程中产生的
CO2造成发酵液溢出；便于酵母菌进行有氧呼吸，快速繁殖，酵母菌数量增加，利于随后进行酒精发酵
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(2)由图2可知，桑葚汁与玫瑰质量比对酒精度_________(填“影响显著”或“影响不大”)，花色苷含量随着桑葚汁与玫瑰质量比的增大而_____
(填“增加”或“降低”)，桑
葚汁与玫瑰质量比为______时
感官评分最高。在原料中添加
一定量的糖可以提高酒精度，
原因是____________________
__________________________
_________________________________。
影响不大
降低
4∶1
糖类是主要的能源物质，
可以为酵母菌的生长、繁殖提
供能量，还可以作为酒精发酵的原料
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(3)桑葚玫瑰酒如果暴露在空气中一段时间，酒味会逐渐消失而出现酸味，其原因是_______
_________________________________________________________________________________。
在有氧
条件下，醋酸菌将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转变为乙酸，该过程消耗了酒精产生了醋酸
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15.某研究小组分离提纯葡萄皮上的野生酵母菌时，选取了从自然界中采集到的葡萄，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中进行培养。请回答下列问题：
(1)配制酵母菌培养液时，需控制培养液的浓度，浓度过高则会导致______
______________。另需加入一定剂量的青霉素等抗生素，其目的是______
___________。
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失水过多死亡
酵母菌
细菌的生长
抑制
(2)该研究小组成功分离出某品种的酵母菌后，取等量菌液分别接种于3个盛有等量液体培养基的锥形瓶中，并分别置于转速为150 r/min、200 r/min、250 r/min的摇床上培养，检测结果如图1所示，摇床转速为250 r/min的酵母菌种群密度最大的原因是___________________________
___________________________________。
摇床转速越高，提供的氧气越充足，酵母菌代谢越旺盛、增殖越快
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(3)图2是采用血细胞计数板直接计数和稀释涂布平板法计数两种方法计数培养液中酵母菌数量时得到的结果，其中采用稀释涂布平板法计数得到的是曲线______，下列判断依据中正确的有_________(填序号)。
①稀释涂布平板法只计数活的酵母菌细胞，死细胞无法形成菌落
②采用血细胞计数板直接计数时，可能会将死细胞与
活细胞一起计数
③采用稀释涂布平板法计数时，两个或多个细胞连在
一起时，只能观察到一个菌落
④采用稀释涂布平板法计数时，可能因培养时间不足
而导致遗漏菌落的数目
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乙
①②③④
(4)通过如图3所示的方法进行纯化培养时，用移液枪取最终的酵母菌稀释液0.1 mL滴在培养基表面，然后将蘸有少量酒精的涂布器__________后再进行涂布。在恒温培养箱中培养一段时间后，其中某组的3个平板上菌落数分别为69个、52个、44个，则可以推测原酵母菌液中每毫升含菌数为________个。
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灼烧冷却
5.5×107
(5)稀释涂布平板法的计数原理是____________________________________
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当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约有多少活菌
16.(2021·湖南，21改编)大熊猫是我国特有的珍稀野生动物，每只成年大熊猫每日进食竹子量可达12～38 kg。大熊猫可利用竹子中8%的纤维素和27%的半纤维素。研究人员从大熊猫粪便和土壤中筛选纤维素分解菌。请回答下列问题：
(1)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以_______为唯一碳源的固体培养基上进行培养，该培养基从功能上分类属于______培养基。
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纤维素
选择
在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以纤维素为唯一碳源的固体培养基上进行培养；培养基从功能上分类可分为选择培养基和鉴别培养基，故该培养基从功能上分类属于选择培养基。
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为检测灭菌效果可对培养基进行空白培养，即将未接种的培养基在适宜条件下培养一段时间，若在适宜条件下培养基中无菌落出现，说明培养基灭菌彻底，否则说明培养基灭菌不彻底。
(2)配制的培养基必须进行灭菌处理，目的是________________________
_____________________。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是_____
___________________。
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(微生物和芽孢、孢子)
杀死培养基中的所有微生物
种培养(或空白培养)
不接
(3)简要写出测定大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数的实验思路：_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。
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将大熊猫新鲜粪便样液稀释适当倍数后，取0.1 mL涂布到若干个平板(每个稀释度至少涂布三个平板)，对菌落数在30～300的平板进行计数，则可根据公式推测大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数
(4)为高效降解农业秸秆废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌，在37 ℃条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株_____，理由是_______________
_____________________________。
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菌株 秸秆总重/g 秸秆残重/g 秸秆失重/% 纤维素降解率/%
A 2.00 1.51 24.50 16.14
B 2.00 1.53 23.50 14.92
C 2.00 1.42 29.00 23.32
C
秆失重最多，纤维素降解率最大
接种C菌株后秸
测定酶活力时可以用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表示。由表格可知，在相同的温度和时间下，C菌株使秸秆失重最多，纤维素降解率最大，说明该菌株产生的纤维素酶活力最大。
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16作业5　重点突破练(一)
(分值：100分)
第1～11题，每题4分；第12～13题，每题5分，共54分。
题组一　传统发酵技术
1．下列关于传统发酵的叙述，正确的是(　　)
A．每日从泡菜坛中取少量泡菜品尝，以确定自制泡菜是否可以食用
B．利用传统作坊中的酒曲，有利于大规模生产黄酒
C．将葡萄汁煮沸冷却后灌入约2/3瓶，密闭发酵即可自制葡萄酒
D．腐乳制作过程中需要添加蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等
2．(2024·清远高二期中)泡菜是我国的传统美食，早在《诗经》中就有“中田有庐，疆场有瓜，是剥是菹，献之皇祖”的诗句，其中“庐”和“瓜”是蔬菜，“剥”和“菹”是腌制加工的意思。下列关于泡菜制作的叙述，正确的是(　　)
A．制备泡菜时，盐水煮沸后可以立即使用
B．腌制时间长短和温度高低不会影响亚硝酸盐的含量
C．泡菜“咸而不酸”可能是盐水浓度过高，抑制乳酸菌发酵所致
D．泡菜腌制过程中乳酸和亚硝酸盐的含量均先增加后趋于稳定
3．(2023·邯郸高二期末)蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”“口服化妆品”等。如图是以新鲜蓝莓为原料制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图。下列叙述错误的是(　　)
A．在制作蓝莓酒时，温度应该控制在18～30 ℃
B．若氧气、糖源充足，蓝莓汁可直接经过程③发酵为蓝莓醋
C．若处理不当，在酒精发酵旺盛时，醋酸菌可将糖分解为乙酸
D．在酸性条件下用重铬酸钾溶液检测，若果汁出现灰绿色说明有蓝莓酒产生
4．如图1为果酒、果醋制作装置，图2为果酒发酵中酵母菌种群数量、葡萄糖浓度和乙醇浓度的变化曲线。下列叙述正确的是(　　)
A．制作果酒的整个过程中，夹子①②均关闭，制作果醋时，夹子①②均打开
B．制作果酒时应将图1装置放在18～30 ℃环境中，制作果醋时应将温度提高至30～35 ℃
C．图2曲线a～b段，瓶内有大量二氧化碳和水产生，导致瓶内气压增大
D．随着发酵时间的推进，葡萄糖含量降低，乙醇的产生速率先上升后趋于稳定
题组二　微生物的基本培养技术
5．(2024·阳泉高二期中)无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开。下列说法正确的是(　　)
A．巴氏消毒的最大优点是能够杀死牛奶中的全部微生物
B．对接种室、涂布器、操作者的衣着和双手需要进行消毒处理
C．培养基可借助高压蒸汽灭菌锅或干热灭菌箱进行灭菌
D．利用寄生于细菌体内的微生物裂解细菌来净化污水属于生物消毒法
6.(2023·昭通高二期中)如图是利用平板划线法在培养基上获得微生物单菌落的实验操作，下列叙述错误的是(　　)
A．划线操作时，接种环只蘸取一次菌液
B．不能将第④区域的划线和第①区域的相连
C．观察菌落特征的最佳区域是①区域
D．在②～④区域划线前后均要灼烧接种环
7．如图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法正确的是(　　)
A．制备培养基的过程是先灭菌再调pH
B．操作步骤②③④时接种环只需要在接种前和划线结束后灼烧灭菌
C．完成上述纯化过程，接种环共需灼烧处理6次
D．接种结束后，将平板倒置培养，在皿盖上标注菌种及接种日期等信息
8．如表为某培养基的配方，下列有关叙述正确的是(　　)
成分 牛肉膏 葡萄糖 K2HPO4 伊红—亚甲蓝 琼脂 蒸馏水
含量 10 g 10 g 2 g 0.46 g 适量 1 000 mL
注：伊红—亚甲蓝可用于鉴别大肠杆菌，使菌落染成深紫色，带金属光泽。
A．能在此培养基上生长的只有大肠杆菌
B．培养基中葡萄糖作为碳源，牛肉膏可以作为碳源和氮源
C．该培养基调节合适的pH后就可以接种使用
D．从物理性质看，该培养基属于固体培养基，从用途看，该培养基属于选择培养基
题组三　微生物的选择培养和计数
9．某种细菌菌株需要亮氨酸才能生长，但此菌株对链霉素敏感。实验者用诱变剂处理此菌株，想筛选出表格中细菌菌株类型，则配制相应选择培养基类型正确的是(　　)
选项 筛选出不需要亮氨酸的菌株 筛选出抗链霉素的菌株 筛选出不需要亮氨酸且抗链霉素的菌株
A L＋　S＋ L－　S－ L＋　S－
B L－　S－ L＋　S＋ L－　S＋
C L－　S＋ L＋　S＋ L－　S－
D L＋　S－ L－　S－ L＋　S＋
注：L代表亮氨酸，S代表链霉素；“＋”代表加入，“－”代表不加入。
10．某种物质X(一种含有C、H、O、N的有机物)难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解X。研究人员按照如图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解X的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和X，乙的组分为无机盐、水、X和Y。下列相关叙述中错误的是(　　)
A．甲、乙培养基均属于选择培养基，乙培养基组分中的Y物质是琼脂
B．若要筛选高效降解X的细菌菌株，甲、乙培养基中X是唯一的碳源
C．步骤⑤的筛选过程中，各培养瓶中的X溶液要有一定的浓度梯度
D．步骤⑤的筛选过程中，若培养基中的X浓度过高，某菌株对X的降解量可能下降
11．(2024·宝鸡高二月考)尿素是一种重要的农业肥料，尿素分解菌可合成脲酶，利用以尿素为唯一氮源的选择培养基可从土壤中分离尿素分解菌并进行计数，科研人员取0.1 g土壤分别稀释103～107倍，将0.1 mL不同稀释倍数的土壤稀释液接种在固体培养基上，在相同的培养条件下得到如表数据。下列叙述正确的是(　　)
稀释倍数 103 104 105 106 107
菌落数/个 1号平板 478 367 270 26 5
2号平板 496 354 268 20 8
3号平板 509 332 272 29 3
A.利用稀释涂布平板法可将稀释液中的菌体完全分离，一个菌落对应一个菌体
B．每克土壤中尿素分解菌的数量是2.7×108个
C．以尿素为唯一氮源的培养基上长出的菌均为尿素分解菌
D．若在显微镜下利用细菌计数板直接计数，则统计结果一般比实际活菌数少
12．下列有关利用稀释涂布平板法对土壤中微生物进行计数的说法，正确的是(　　)
A．相同稀释倍数的样液至少涂布三个平板才能保证结果的准确性
B．将不同稀释度下计数的菌落数求平均值得到较为准确的菌落数
C．本实验无须设置空白对照组
D．土壤中真菌的数量比细菌的数量多，所以真菌的稀释倍数要比细菌大
13．(2024·雅安高二期中)如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图，下列有关叙述错误的是(　　)
A．获得高效分解尿素细菌纯培养物的关键是防止杂菌污染，故应对培养基及用具等进行灭菌
B．步骤③采用稀释涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
C．若要判断选择培养基是否起到了选择作用，需要设置接种了的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照
D．步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，分解尿素能力高的会产生更多的NH3，溶液pH更高
14．(16分)桑葚玫瑰酒既融合了桑葚和玫瑰的果香、花香，又使其营养价值和功能活性增加，能极大地满足人们的需求。图1为制作桑葚玫瑰酒的装置图；图2为不同桑葚汁与玫瑰质量比对花色苷含量、酒精度和感官评分(感官评分越高，品质越好)的影响。回答下列问题：
(1)桑葚玫瑰酒发酵利用的菌种的代谢类型是______________________。在桑葚玫瑰酒发酵过程中，图1装置的排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，目的是_________________。制作桑葚玫瑰酒时，原料只装容器的2/3，预留一定空间的目的是________________________
_______________________________________________________________________________。
(2)由图2可知，桑葚汁与玫瑰质量比对酒精度________________(填“影响显著”或“影响不大”)，花色苷含量随着桑葚汁与玫瑰质量比的增大而____________(填“增加”或“降低”)，桑葚汁与玫瑰质量比为____________时感官评分最高。在原料中添加一定量的糖可以提高酒精度，原因是____________________________________________________________________。
(3)桑葚玫瑰酒如果暴露在空气中一段时间，酒味会逐渐消失而出现酸味，其原因是_______________________________________________________________________________。
15．(16分)某研究小组分离提纯葡萄皮上的野生酵母菌时，选取了从自然界中采集到的葡萄，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中进行培养。请回答下列问题：
(1)配制酵母菌培养液时，需控制培养液的浓度，浓度过高则会导致_____________________。另需加入一定剂量的青霉素等抗生素，其目的是_____________________________________。
(2)该研究小组成功分离出某品种的酵母菌后，取等量菌液分别接种于3个盛有等量液体培养基的锥形瓶中，并分别置于转速为150 r/min、200 r/min、250 r/min的摇床上培养，检测结果如图1所示，摇床转速为250 r/min的酵母菌种群密度最大的原因是_____________________。
(3)图2是采用血细胞计数板直接计数和稀释涂布平板法计数两种方法计数培养液中酵母菌数量时得到的结果，其中采用稀释涂布平板法计数得到的是曲线________，下列判断依据中正确的有____________(填序号)。
①稀释涂布平板法只计数活的酵母菌细胞，死细胞无法形成菌落
②采用血细胞计数板直接计数时，可能会将死细胞与活细胞一起计数
③采用稀释涂布平板法计数时，两个或多个细胞连在一起时，只能观察到一个菌落
④采用稀释涂布平板法计数时，可能因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目
(4)通过如图3所示的方法进行纯化培养时，用移液枪取最终的酵母菌稀释液0.1 mL滴在培养基表面，然后将蘸有少量酒精的涂布器__________后再进行涂布。在恒温培养箱中培养一段时间后，其中某组的3个平板上菌落数分别为69个、52个、44个，则可以推测原酵母菌液中每毫升含菌数为________个。
(5)稀释涂布平板法的计数原理是__________________________________________________。
16．(14分)(2021·湖南，21改编)大熊猫是我国特有的珍稀野生动物，每只成年大熊猫每日进食竹子量可达12～38 kg。大熊猫可利用竹子中8%的纤维素和27%的半纤维素。研究人员从大熊猫粪便和土壤中筛选纤维素分解菌。请回答下列问题：
(1)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以__________为唯一碳源的固体培养基上进行培养，该培养基从功能上分类属于________培养基。
(2)配制的培养基必须进行灭菌处理，目的是______________________________________。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是________________。
(3)简要写出测定大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数的实验思路：_______________________________________________________________________________。
(4)为高效降解农业秸秆废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌，在37 ℃条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株____________，理由是___________________________________________________________。
菌株 秸秆总重/g 秸秆残重/g 秸秆失重/% 纤维素降解率/%
A 2.00 1.51 24.50 16.14
B 2.00 1.53 23.50 14.92
C 2.00 1.42 29.00 23.32
答案精析
1．B　[泡菜制作过程中乳酸菌进行无氧呼吸，不能每天打开泡菜坛，否则会导致发酵失败，A错误；酒曲中含有酵母菌，利用传统作坊中的酒曲，有利于大规模生产黄酒，B正确；发酵果酒的葡萄汁不能煮沸，否则会杀死葡萄汁中的野生酵母菌，C错误；在腐乳制作发酵过程中，微生物会产生蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等多种酶，不需要添加，D错误。]
2．C　[制备泡菜时，盐水煮沸冷却后再使用，防止高温杀死乳酸菌，A错误；影响亚硝酸盐含量的因素较多，如制作泡菜时食盐用量、腌制时间长短和温度高低等，B错误；泡菜腌制过程中，亚硝酸盐含量先增加后减小，最后趋于稳定，乳酸含量先增加后保持稳定，D错误。]
3．C　[参与果酒制作的微生物是酵母菌，其最适生长温度约为28 ℃，在制作蓝莓酒时，温度应该控制在18～30 ℃，A正确；过程③是乙酸发酵，所用的微生物是醋酸菌，醋酸菌在氧气、糖源都充足的条件下可直接将蓝莓汁发酵为蓝莓醋，B正确；酒精发酵为无氧环境，而醋酸菌是好氧细菌，即使发酵装置中含有醋酸菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸菌也不能将果汁中的糖分解为乙酸，C错误；利用重铬酸钾溶液在酸性条件下检测，若出现灰绿色，说明有酒精产生，D正确。]
4．B　[制作果酒的过程中，夹子①先打开后关闭，夹子②在发酵过程中间歇打开，果醋发酵时需要氧气，因此用图1装置进行果醋发酵时，需打开夹子①②，A错误；图2曲线a～b段，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，酵母菌有氧呼吸过程中氧气消耗量等于二氧化碳产生量，因此瓶内的气压基本不变，C错误；分析图2可知，随着发酵时间的推进，葡萄糖含量降低，乙醇的浓度先上升后趋于稳定，但乙醇的产生速率先上升，后下降为0，D错误。]
5．D　[巴氏消毒的最大优点是能够杀死牛奶中的绝大部分微生物，并且基本不破坏牛奶的营养成分，A错误；对接种室、操作者的衣着和双手需要进行消毒处理，对涂布器要进行灭菌处理，B错误；培养基可借助高压蒸汽灭菌锅进行灭菌，不能用干热灭菌箱进行灭菌，C错误。]
6．C　[①区域是划线开始的区域，此区域接种微生物较多，不易出现单菌落，④区域最易出现单菌落，是观察菌落特征的最佳区域，C错误。]
7．C　[步骤①表示倒平板，倒平板的培养基需要先调节pH后灭菌，A错误；接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以完成步骤④中5次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，防止造成污染，由此可见，完成步骤④共需灼烧接种环6次，B错误，C正确；接种结束后，将平板倒置培养，在皿底上(不是在皿盖上)标注菌种及接种日期等信息，D错误。]
8．B　[此培养基中能生长多种微生物，不是只有大肠杆菌，A错误；培养基中葡萄糖作为碳源并提供能量，牛肉膏可以为微生物的生长繁殖提供碳源和氮源，B正确；该培养基调节合适的pH后要进行湿热灭菌操作，C错误；从物理性质看，该培养基含有琼脂，属于固体培养基，从用途看，该培养基用于鉴定大肠杆菌，属于鉴别培养基，D错误。]
9．B　[筛选不需要亮氨酸的菌株时培养基中不需要添加链霉素和亮氨酸；筛选抗链霉素的菌株时需要向培养基中添加链霉素和亮氨酸；筛选不需要亮氨酸且抗链霉素的菌株时需要向培养基中添加链霉素，但不添加亮氨酸，B正确。]
10．C　[步骤⑤中自变量是挑取的不同的菌落，各培养瓶中的X溶液的浓度应该是一致的，C错误。]
11．B　[利用稀释涂布平板法进行微生物的纯化和计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，A错误；该实验中稀释倍数为105的平板菌落数在30～300范围内，最适合用来统计活菌数，每克土壤中尿素分解菌的数量为(270＋268＋272)÷3÷0.1×
105＝2.7×108(个)，B正确；以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不一定是尿素分解菌，有些微生物可以利用尿素分解菌的代谢物进行生长繁殖，C错误；若在显微镜下利用细菌计数板直接计数，由于不能区分活菌和死菌，则统计结果一般比实际活菌数多，D错误。]
12．A　[为了保证结果准确，一般选取同一稀释度下、菌落数在30～300的平板进行计数，B错误；土壤中真菌的数量比细菌的数量少，D错误。]
13．B　[步骤③筛选分解尿素的细菌，培养基中应以尿素为唯一氮源，不能加入牛肉膏蛋白胨，B错误。]
14．(1)异养兼性厌氧型　防止空气中微生物的污染　防止发酵过程中产生的CO2造成发酵液溢出；便于酵母菌进行有氧呼吸，快速繁殖，酵母菌数量增加，利于随后进行酒精发酵
(2)影响不大　降低　4∶1　糖类是主要的能源物质，可以为酵母菌的生长、繁殖提供能量，还可以作为酒精发酵的原料　(3)在有氧条件下，醋酸菌将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转变为乙酸，该过程消耗了酒精产生了醋酸
15．(1)酵母菌失水过多死亡　抑制细菌的生长　(2)摇床转速越高，提供的氧气越充足，酵母菌代谢越旺盛、增殖越快　(3)乙　①②③④　(4)灼烧冷却　5.5×107　(5)当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约有多少活菌
16．(1)纤维素　选择　(2)杀死培养基中的所有微生物(微生物和芽孢、孢子)　不接种培养(或空白培养)　(3)将大熊猫新鲜粪便样液稀释适当倍数后，取0.1 mL涂布到若干个平板(每个稀释度至少涂布三个平板)，对菌落数在30～300的平板进行计数，则可根据公式推测大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数　(4)C　接种C菌株后秸秆失重最多，纤维素降解率最大
解析　(1)在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以纤维素为唯一碳源的固体培养基上进行培养；培养基从功能上分类可分为选择培养基和鉴别培养基，故该培养基从功能上分类属于选择培养基。(2)为检测灭菌效果可对培养基进行空白培养，即将未接种的培养基在适宜条件下培养一段时间，若在适宜条件下培养基中无菌落出现，说明培养基灭菌彻底，否则说明培养基灭菌不彻底。(4)测定酶活力时可以用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表示。由表格可知，在相同的温度和时间下，C菌株使秸秆失重最多，纤维素降解率最大，说明该菌株产生的纤维素酶活力最大。