专题十五 基因工程——高考生物学三年(2022-2024)真题精编卷（答案）

高考生物学三年（2022-2024）真题精编卷
专题十五 参考答案
1.答案：A
解析：DNA 的粗提取和鉴定实验研磨后，可以将研磨液过滤到烧杯中，在 4℃
冰箱中放置几分钟后，再取上清液，可以不使用离心机，A 正确，B 错误；鉴定
过程中的沸水浴加热可使 DNA 双螺旋结构发生改变，C 错误；该实验中，为排
除二苯胺加热后可能变蓝对实验结果造成干扰，可设置加二苯胺不加 DNA 的对
照组，D 错误。
2.答案：D
解析：研磨液有利于 DNA 的溶解，换为蒸馏水，DNA 提取的效率会降低，A 正
确；DNA 不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精，可分离 DNA，B
正确；DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度随着 NaCl 浓度的变化而改变，因此可用不
同浓度的 NaCl 溶液对 DNA 进行粗提取，C 正确；在沸水浴的条件下，DNA 遇
二苯胺会被染成蓝色，二苯胺试剂用于鉴定 DNA，D 错误。
3.答案：B
解析：DNA 复制过程中，子链的合成方向是 5'→3'，由扩增获得的 DNA 片段可
知，一个引物序列是 5'-TGCGCAGT-3'，另一个引物序列是 5'-AGCTAGCA-3'，A
正确；扩增获得的 DNA 片段中没有限制酶 SpeI 的识别序列，步骤①不能用限制
酶 SpeI 进行酶切，经分析可知，步骤①所用的限制酶是 NheI 和 CfoI，B 错误；
步骤①用到两种限制酶进行切割，这两种限制酶的识别序列不同，载体一般为环
状，且载体中至少含有 1 个限制酶 NheI 的识别序列，至少含有 1 个限制酶 CfoI
的识别序列。因此，用步骤①的酶对载体进行酶切，至少可获得 2 个片段，C 正
确；用步骤①的两种限制酶进行切割后形成的都是黏性末端，E.coliDNA 连接酶
和 T4 DNA 连接酶都可“缝合”黏性末端，D 正确。
4.答案：D
解析：试管婴儿属于有性生殖，合理范围内，试管婴儿技术是可以使用的，A 错
误；治疗性克隆要在严格监管下进行，B 错误；生殖性克隆会引起严重的道德、
伦理、社会和法律问题，C 错误。
5.答案：A
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解析：胰岛素作用于细胞表面的受体，不需要经高尔基体的加工，A 错误；人工
长效胰岛素比人胰岛素的 B 链上多了两个精氨酸，氨基酸与氨基酸之间通过肽
键连接，故多 2 个肽键，B 正确；人工胰岛素和人胰岛素作用相同，都是降血糖
的作用，故靶细胞相同，C 正确；人工长效胰岛素是对天然蛋白质的改造，需要
通过基因工程生产，D 正确。
6.答案：D
解析：DNA 粗提取与鉴定实验的基本过程是：裂解、分离、沉淀、鉴定。裂解
的目的是使细胞破裂，释放出 DNA 等物质，A 正确；DNA 不溶于酒精，但某些
蛋白质溶于酒精，利用这一原理，可以初步分离 DNA 与蛋白质等，DNA 分离过
程中混合物中的多糖、蛋白质等可被去除，B 正确；DNA 在不同浓度的 NaCl
溶液中溶解度不同，通过控制 NaCl 溶液的浓度去除杂质，可反复多次以提高
DNA 的纯度，C 正确；进行 DNA 鉴定时可以使用二苯胺试剂，但要进行沸水浴
加热后才能观察到颜色变化，D 错误。
7.答案：D
解析：若用 HindⅢ酶切质粒和含有目的基因的 DNA 片段，用 DNA 连接酶将两
者连接成重组质粒，目的基因和质粒有正向连接和反向连接两种连接形式，因此，
目的基因转录的产物可能不同，A 正确；若用 PvuⅠ酶切，会破坏氨苄青霉素抗
性基因，在含 Tet（四环素）培养基中的菌落可能是含有目的基因的重组质粒，
也可能是质粒自身连接的普通质粒，因此，在含 Tet（四环素）培养基中的菌落，
不一定含有目的基因，B 正确；若用 SphⅠ酶切，由于重组质粒和普通质粒的碱基
对数不同，因此可通过 DNA 凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否，C 正确；
若用 SphⅠ酶切，会破坏四环素抗性基因，氨苄青霉素抗性基因不受影响，因此携
带目的基因的受体菌在含 Amp（氨苄青霉素）的培养基中能形成菌落，不能在
含 Tet（四环素）的培养基中形成菌落，D 错误。
8.答案：A
解析：题意显示，研究人员采用如图方法将酿酒酵母 S 的 L-谷氨酸脱羧酶基因
（gadB）导入生产菌株 E.coli A，说明可以从酿酒酵母 S 中分离得到目的基因
gadB，A 正确；题意显示，用 L-谷氨酸脱羧酶（GadB）催化 L-谷氨酸脱羧是高
效生产 γ-氨基丁酸的重要途径之一，E.coli B 中能表达 L-谷氨酸脱羧酶（GadB），
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因此可用 E.coli B 发酵生产 γ-氨基丁酸，该过程中 L-谷氨酸钠的作用不是供能，
B 错误；E.coli A 中没有 L-谷氨酸脱羧酶（GadB），因而不能降解 L-谷氨酸，
而 E.coliB 中含有该酶的基因，因而能高效降解 γ-氨基丁酸，C 错误；图中质粒
上含有 NcoⅠ和 KpnⅠ的酶切位点，因而不可以用其他酶替代 NcoⅠ和 KpnⅠ构建重组
质粒，D 错误。
9.答案：（1）蛋白质
（2）③
（3）②
（4）标记基因
（5）筛选出导入目的基因的大肠杆菌；5.7
（6）逆转录
解析：（1）蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作
为基础，通过改造或合成基因，来改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质。本
题中根据人们对蛋白质功能的需求，改造了基因，最终获得耐高温的β-淀粉酶
这属于蛋白质工程。（2）PCR 的原理是 DNA 的半保留复制，利用的酶是耐高
温的 DNA 聚合酶，该酶在合成子链时以 DNA 为模板。（3）替换的碱基在编码
序列中，则利用的引物应该把编码序列全部扩增出来，则所用的引物是②③，再
结合题意可知，β-淀粉酶由 484 个氨基酸构成，而替换位，点位于 476 位，则
含已替换碱基的引物是②。（4）作为载体的质粒应该包含：复制原点限制酶的
切割位点标记基因、启动子和终子，根据图示可知，基因表达载体中还应该有目
的基因和标记基因。（5）用 EcoR I 酶切来自不同大肠杆菌菌落的质粒 DNA，
经琼脂糖凝胶电泳确定 DNA 片段长度，可以筛选出导入目的基因的大肠杆菌。
正确连接的基因表达载体中只有一个 EcoR I 酶切位点，则用 EcoR I 切割后的长
度为 4.2+1.5=5.7（kb）。（6）利用 PCR 在分子水平上确定目的基因是否转录，
需要以 RNA 为模板逆转录出 DNA 作为 PCR 的模板。
10.答案：（1）纤维素酶和果胶酶；生长素和细胞分裂素
（2）花药离体培养；利用显微镜观察根尖有丝分裂中期细胞中染色体的数目
（3）Hind Ⅲ、BamH Ⅰ；交链格孢；利用转基因技术将百合 B 中 L 基因的启动
子替换为野生百合中 L 基因的启动子 pL
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解析：（1）因植物细胞细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，因此获得原生质体
的方法是用纤维素酶和果胶酶对植物细胞进行处理。得到原生质体后使原生质体
融合，形成杂种细胞，再用生长素和细胞分裂素诱导愈伤组织形成和分化，从而
获得完整的杂种植株。（2）获得单倍体植株的常用方法是花药（花粉）离体培
养；鉴定百合单倍体植株的方法是利用显微镜观察根尖有丝分裂中期细胞中染色
体的数目，如果染色体数目减少一半，则获得的植株即为单倍体植株。（3）根
据目的片段以及质粒上限制酶的识别位点，若要获得 pL 并连接到质粒上，可选
用限制酶 HindⅢ、BamHI 进行酶切，以替换 Ti 质粒中的启动子，从而达到根据
GUS 酶活性反映启动子活性的目的。根据图 c 的结果可知，交链格孢处理的每
一组转基因烟草中的 GUS 酶活性都最高，可确定其诱导作用最强。欲培育具有
高抗病原微生物能力的百合新品种，可利用转基因技术将百合 B 中 L 基因的启
动子替换为野生百合中 L 基因的启动子 PL。
11.答案：（1）在胚乳中特异性表达的基因；使转录在所需要的地方停下来；
Hind Ⅲ；EcoR Ⅰ
（2）农杆菌转化；是否转录出 mRNA；抗原一抗体杂交
（3）1/4；纯合体自交后代不发生性状分离
（4）体液；细胞
（5）水稻易于种植，容易获得疫苗；水稻的产量较高，能够获得大量的疫苗（合
理即可）
解析：（1）若使 r2HN 仅在水稻胚乳中表达，则 GtP 应为在胚乳中特异性表达
的基因启动子。终止子是基因下游的一端有特殊序列结构的 DNA 片段，使转录
在所需要的地方停下来。r2HN 应插入启动子 GtP 和终止子 Nos 之间，由于 GtP
中有限制酶 KpnI 的识别序列，而 Sac I 的一个识别序列位于终止子之后，因此不
能选择这两种限制酶切割，应选择 Hind Ⅲ和 EcoR I 对 r2HN 和载体进行切割。
（2）通常采用农杆菌转化法将目的基因导入水稻的愈伤组织。检测 r2HN 是否
表达，可以采用 PCR 技术检测该基因是否转录出 mRNA，通过抗原—抗体杂交
技术检测是否翻译出相关蛋白。（3）设 r2HN 为基因 N，则单一位点插入目的
基因的植株的基因型为 Nn，其自交后代的基因型及比例为 NN∶Nn∶nn=1∶2∶
1，r2HN 纯合体植株的比例为 1/4。纯合体自交后代不会发生性状分离，因此选
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择纯合体进行后续研究。（4）抗体参与体液免疫，CD8+T 细胞为细胞毒性 T 细
胞，参与细胞免疫。分析图形，实验组的抗体水平及 CD8+T 细胞水平的相对值
都高于对照组，说明获得的 r2HN 疫苗能够成功激活鸡的体液免疫和细胞免疫。
（5）水稻属于常见的农作物，易于种植，其作为生物反应器容易获得疫苗；水
稻的产量高，作为生物反应器容易从胚乳中大量获得疫苗。
12.答案：（1）稳定性差异；选择性表达
（2）C
（3）其他器官细胞中，G 和 H 两个基因是否转录出相应的 mRNA 或是否翻译出
相应的蛋白质
（4）
解析：（1）细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，
在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。分化是基因选择性表达的结
果。（2）A 依据题干“增强子位于基因上游或下游，与基本启动子共同组成基
因表达的调控序列”可知，增强子是含有特定碱基序列的 DNA 片段，增强子、
基本启动子和它们调控的基因位于同一条染色体上，AB 正确；由图 C 可知，一
个增强子可作用于多个基本启动子，C 错误；依据题干“很多增强子具有组织特
异的活性”可知，很多增强子在不同组织中的活性不同，D 正确。（3）若要确
定这两个基因是否为心脏特异表达的基因，可通过 PCR 等技术检测其他器官细
胞中G和H两个基因是否转录出相应的 mRNA或是否翻译出相应的蛋白质。（4）
增强子位于基因上游或下游，与基本启动子共同组成基因表达的调控序列。基因
工程所用表达载体中的启动子，实际上包含增强子和基本启动子。增强子捕获载
体的插入位点位于基因外部，不会造成基因突变。而当增强子捕获载体的插入位
点位于基因内部，会引起造成该增强子所调控的基因发生突变，为研究某目的基
因的功能，需要将增强子插入到目的基因内部。图如下：
13.答案：（1）溶解度
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（2）启动子；终止子（答案“启动子”和“终止子”不分顺序）；苹果酸酶基
因（或“ME 基因”）
（3）碱基互补配对；对照；引物间的载体序列整合到硅藻细胞基因组中（或“ME
基因序列整合到硅藻细胞基因组中”）
（4）增加；细胞数量
（5）有氧呼吸生成的 ATP 增多
（6）节约土地资源、不受季节和气候限制（或“节约粮食资源”或“节约淡水”
或“能够通过发酵大量生产”）
解析：（1）DNA 不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理，可以初
步分离 DNA 和蛋白质。因此，根据 DNA 和蛋白质在特定浓度乙醇溶液中的溶
解度差异可以得到硅藻的粗提 DNA。以此方法得到的粗提 DNA 可以作为 PCR
扩增目的基因的模板。（2）基因表达载体除目的基因、标记基因外，还必须有
启动子、终止子等。启动子和终止子均为一段有特殊序列结构的 DNA 片段。它
们分别位于目的基因的上下游。本研究中的目的基因是来源于硅藻的苹果酸酶
（ME）基因。（3）PCR 是一项根据 DNA 半保留复制原理，在体外提供参与
DNA 复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技
术。引物是一小段能与 DNA 母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸。对照
实验一般要设置对照组和实验组。本实验的对照组中以非转基因的硅藻细胞基因
组 DNA 作为 PCR 模板，而在实验组中以转 ME 基因的硅藻细胞基因组 DNA 作
为模板。如此比较两个实验扩增结果可以判定引物间的载体序列是否整合到硅藻
细胞的基因组中，从而推测 ME 基因序列是否整合到硅藻细胞基因组中。（4）
硅藻细胞内的脂质含量和繁殖速率是利用单细胞硅藻生产生物柴油的两个重要
影响因素。据图 3 分析可知，相对于非转基因硅藻细胞品系 A，转基因硅藻细胞
品系 B 的胞内脂质含量平均值显著提高。在测定硅藻细胞内脂质含量的同时，
还需测定在相同发酵条件下品系 A 与 B 的硅藻细胞数量，从而可筛选获得高产
生物柴油的优良硅藻细胞品系。（5）细胞内脂质的合成需要大量 ATP。苹果酸
酶（ME）可催化苹果酸生成 NADH。研究表明，品系 B 线粒体中 ME 含量显著
高于品系 A。据此分析可知，ME 基因的超表达导致线粒体中的 NADH 水平升
高，NADH 进一步通过有氧呼吸产生大量 ATP，最终促进细胞内脂质的合成。
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（6）相对于大豆和油菜等油料作物，利用海生硅藻进行生物柴油生产的优势为：
能够通过发酵大量生产、不受季节和气候限制、节约土地资源、节约淡水以及节
约粮食资源等。
14.解析：（1）脂质和蛋白质；参与纺锤体的形成
（2）溶解 DNA；耐高温的 DNA 聚合酶（Taq 酶）；3′
（3）①b；②1100；③Q4；④纤毛基部可能含有 X 蛋白特异性结合的物质
（4）逆转录；32
解析：（1）细胞膜主要由脂质和蛋白质组成。中心体可参与纺锤体的形成，其
与有丝分裂有关。（2）DNA 在 2.0mol/L 的 NaCl 溶液中的溶解度最大，高于或
低于这一浓度，DNA 的溶解度均会下降，因此实验过程中添加 NaCl 至 2.0mol/L
的目的是溶解 DNA。PCR 扩增时，需在耐高温的 DNA 聚合酶（即 Taq 酶）的
催化下，在引物的 3'端进行 DNA 链的延伸，获得扩增产物。（3）据图可知，应
选择图 2 中的引物 a 和引物 b，PCR 目的产物约为 300+800=1100（bp）。结合
题中信息知，Y-M 的连接处上游含有 Hind Ⅲ+EcoR Ⅴ的识别序列，下游含有
EcoR Ⅴ+BamH Ⅰ的识别序列，又知构建 Y-M 重组质粒时，在 EcoRⅤ识别位点插
入片段，则 Y-M 连接处测序后部分序列应含 EcoR Ⅴ的识别序列，根据各限制酶
识别序列分析，质粒测序正确的是 Q4。（4）RNA 在逆转录酶的作用下可形成
cDNA。结合题中信息知，在总 cDNA 模板量相等的条件下，健康人 Ct 值为 15，
而病人 Ct 值为 20，说明病人的基因 Z 表达水平较低，设健康人 Z 基因的 mRNA
数为 x，病人 Z 基因的 mRNA 数为 y，则有 x×215=y×220，从理论上估算，在 PCR
扩增 20 个循环的产物中，健康人样品的目的产物大约是病人的 25=32（倍）。
15.答案：（1）野生型
（2）载体（基因表达载体）；启动子和终止子
（3）①DA1 基因（和卡那霉素抗性基因）；②75；③自交；100；如图所示
解析：（1）据题干信息可知，突变体是由野生型 DA1 基因发生隐性突变形成的，
采用农杆菌转化法将野生型 DA1 基因转入突变体植株，若突变体表型确由隐性
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突变造成，由于转入的基因为显性基因，则转基因植株的种子大小应与野生型植
株的种子大小相近。（2）利用 PCR 技术扩增 DA1 基因后，应该用同种限制性
核酸内切酶对 DA1 基因和运载体进行切割，再用 DNA 连接酶将两者连接起来：
在基因表达载体中，启动子位于目的基因的首端，终止子位于目的基因的尾端，
因此为确保插入的 DA1 基因可以正常表达，其上下游序列需具备启动子和终止
子。（3）①卡那霉素抗性基因为标记基因，标记基因的作用是鉴别受体细胞中
是否含有目的基因，从而将含有目的基因的受体细胞筛选出来。用农杆菌转化
T0 代植株并自交，将 T1 代种子播种在含有卡那霉素的培养基上，能够萌发并生
长的阳性个体即表示其基因组中插入了 DA1 基因（和卡那霉素抗性基因）。②
假设 DA1 基因用 A 表示，结合题中信息知，T1 代中能在含有卡那霉素的培养基
上生长的植株的基因型为 Aa 或 AA 或多位点插入，T1 代阳性植株自交所得 T2
代种子按单株收种并播种于含有卡那霉素的培养基上，T1 代阳性植株基因型为
Aa 时，该植株上所结种子有 75%能够萌发并长成幼苗，因此，应选择阳性率约
为 75%的培养基中幼苗继续培养。③T2 代阳性植株的基因型为 1/3A2/3Aa，将②
中选出的 T2 代阳性植株自交，所得的 T3 代种子按单株收种并播种于含有卡那霉
素的培养基上，基因型为 AA 的植株自交，其后代不会发生性状分离，在含有卡
那霉素的培养基上，所有种子都能够萌发并生长，而基因型为 Aa 的植株自交，
其后代会发生性状分离，在含有卡那霉素的培养基上部分种子不能萌发，因此阳
性率达到 100%的培养基中的幼苗为纯合子（AA），即目标转基因植株。分析题
图可知，野生型相关基因中不含限制性核酸内切酶 X 的识别序列，不能被该酶
切割，已知 DA1 基因的长度为 150bp，因此，野生型相关基因被限制性核酸内切
酶 X 切割并电泳后得到的条带为 150bp。突变型相关基因中含有限制性核酸内切
酶 X 的识别序列，用该酶切割后，突变基因被切割成 100bp、50bp 两种 DNA 片
段，经电泳后得到的条带为 100bp 和 50bp。突变型和野生型相关基因经限制性
核酸内切酶 X 切割并电泳后得到的结果如图所示。
生物学·参考答案 第 8 页（共 8 页）高考生物学三年（2022-2024)真题精编卷
C,生殖性克隆不存在伦理道德方面的风险
D.我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验
专题十五基因工程
5.【2022·重庆卷】将人胰岛素A链上1个天冬氨酸替换为甘氨酸，B链末端增加2个精氨酸，
一、单项选择题：在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
可制备出一种人工长效胰岛素。下列关于该胰岛素的叙述，错误的是()
1.【2024·山东卷】关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法正确的是()
A.进入人体后需经高尔基体加工
B.比人胰岛素多了2个肽键
A整个提取过程中可以不使用离心机
C.与人胰岛素有相同的靶细胞
D.可通过基因工程方法生产
B.研磨液在4℃冰箱中放置几分钟后，应充分摇匀再倒入烧杯中
6.【2023·广东卷】“DNA的粗提取与鉴定”实验的基本过程是：裂解→分离→沉淀→鉴定。下
C.鉴定过程中DNA双螺旋结构不发生改变
列叙述错误的是()
D.仅设置一个对照组不能排除二苯胺加热后可能变蓝的干扰
A.裂解：使细胞破裂释放出DNA等物质
2.【2024·安徽卷】下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是()
B分离：可去除混合物中的多糖、蛋白质等
A.实验中如果将研磨液更换为蒸馏水，DNA提取的效率会降低
C.沉淀：可反复多次以提高DNA的纯度
B.利用DNA和蛋白质在酒精中的溶解度差异，可初步分离DNA
D.鉴定：加入二苯胺试剂后即呈现蓝色
C.DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同，该原理可用于纯化DNA粗提物
7.【2023·湖北卷】用氨苄青霉素抗性基因(AmpR)、四环素抗性基因(TetR)作为标记基因构
D,将溶解的DNA粗提物与二苯胺试剂反应，可检测溶液中是否含有蛋白质杂质
建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达
3.【2023·重庆卷】某小组通过PC(假设引物长度为8个碱基短于实际长度)获得了含有目的
载体（重组质粒），并转化到受体菌中。下列叙述错误的是()
基因的DNA片段，并用限制酶进行酶切（下图），再用所得片段成功构建了基因表达载体。下
HindⅢ
列叙述错误的是()
PvuI、
Sph I
Sca I
AmpR
-Sal I
限制酶SpeI5-CTAGT-3'heI5-(GCTAGC--3'CpI5-GCGC-3
识别序列
3-TGATCA-5
3-CGATCG-5'
3-CGCG-5
质粒
扩增得S'-AGCTAGCAATGCTC…ATGAACTGC(GCA-3
的IDNA片段3'-TCGATCGTTACGAG+TACTTGACGCGT-5'
①酶切
A.若用Hind酶切，目的基因转录的产物可能不同
5-CTAGCAATGCTC...ATGAACTGCG-3
B.若用PvuI酶切，在含Tt(四环素)培养基中的菌落，不一定含有目的基因
3-GTTACGAGTACTTGAC-5'
C,若用SphI酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否
A.其中一个引物序列为5'-TGCGCAGT-3'
B.步骤①所用的酶是SpeI和CfoI
D.若用SphI酶切，携带目的基因的受体菌在含Amp(氨苄青霉素)和Tet的培养基中能形成菌落
8.【2024·江西卷】Y-氨基丁酸在医药等领域有重要的应用价值。利用L-谷氨酸脱羧酶(GadB)
C.用步骤①的酶对载体进行酶切，至少获得了2个片段
D.酶切片段和载体连接时，可使用E.coi连接酶或T4连接酶
催化L-谷氨酸脱羧是高效生产Y-氨基丁酸的重要途径之一。研究人员采用如图方法将酿酒酵母S
的L-谷氨酸脱羧酶基因(gadB)导入生产菌株E.coliA构建了以L-谷氨酸钠为底物高效生产y-氨
4.【2023·浙江卷】以哺乳动物为研究对象的生物技术己获得了长足的进步。对生物技术应用于
人类，在安全与伦理方面有不同的观点，下列叙述正确的是()
基丁酸的菌株E.coiB。下列叙述正确的是()
A.试管婴儿技术应全面禁止
B.治疗性克隆不需要监控和审查
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